Western blot 一抗怎么选？靶点、种属、实验应用与货号核对的完整指南

试剂选型干货 

一抗（Primary Antibody）是指能特异性识别并结合目标蛋白（抗原）的抗体，在 Western blot（免疫印迹）实验中，它直接决定了检测条带的特异性和灵敏度，是整张 WB 膜上"条带对不对"的第一道关口。很多实验室遇到的条带位置异常、非特异杂带多、信号弱等问题，追溯起来往往不是操作失误，而是一抗在选型阶段就没有匹配到位。本文按选型逻辑自上而下拆解，并给出代理品牌抗体资源的货号查询路径。

一、先问三个问题：靶点、种属、应用是否对得上

选一抗不是先挑品牌，而是先确认三个基本信息：

1. 靶蛋白是什么：明确蛋白全名、基因名（如 GAPDH、β-Actin），注意区分不同亚型（isoform）；

2. 样本种属是什么：人、小鼠、大鼠还是其他？抗体说明书标注的"reactivity（反应种属）"必须覆盖你的样本；

3. 应用是什么：同一靶点抗体未必同时适用于 WB、IHC、IP。抗体说明书中标注的应用验证（application）一栏，应明确包含 WB 或 Western Blot。

二、克隆类型怎么选：多克隆与单克隆各有适用场景

多克隆抗体（Polyclonal）：识别同一抗原的多个表位，信号通常较强、对蛋白降解或构象变化有一定容忍度，适合快速摸条件；批次间存在差异是客观情况，建议实验设计时预留同一批次用量。

单克隆抗体（Monoclonal）：识别单一表位，特异性好、批次一致性强，适合长期固定课题与定量比较；缺点是对表位依赖性强，若表位在样品处理中被破坏则无信号。

初步筛选时可多克隆、单克隆各备一支小规格做对比，以数据说话。

三、代理品牌资源怎么用：三条查询路径

我们代理的品牌在抗体资源上各有侧重，其中 Merck / Sigma-Aldrich 体系由多个历史子品牌整合而来，各有专长：

🟣 Merck / Sigma-Aldrich：查询入口 sigmaaldrich.cn，在抗体分类下按靶点 + 应用（WB）筛选。主要子品牌包括：

· Chemicon®（神经科学经典）：如Anti-NeuN（MAB377，神经元标志物，文献引用超6000次，占总文献85%以上）、Anti-GFAP（MAB360，星形胶质细胞主要标志物，引用超1182次）、Anti-TH（AB152，引用超1932次）、Anti-GAD67（MAB5406，引用超850篇，位居首位）、Anti-ChAT（AB144P，文献引用约 2,200 次）、Anti-β-Amyloid（MAB348，阿尔茨海默研究领域常用），胆碱能/多巴胺能/GABA 能神经元标志物系列较为齐全；

· Upstate®（表观遗传代表）：组蛋白修饰抗体引用率居前，如乙酰化组蛋白H3抗体（06-599，引用超2250次，引用率位列首位）、 H3K27me3（07-449，引用约 2,296 次）、磷酸化 H2A.X/JBW301（05-636，引用约 3,271 次）、H3K4me3（07-473，引用次数超1070次），ChIP/ChIP-seq 应用验证资料充分；

· Prestige Antibodies®（HPA 金标抗体）：源自瑞典人类蛋白质图谱（HPA）计划，每支抗体附 700+ 张验证图片，覆盖 40 种正常组织、20 种癌种、56 种细胞系，均有病理学家注释。如自噬标志物抗体Anti-LC3B（L7543，引用超1520次）、Anti-p62/SQSTM1（P0067）、Anti-PLA2R1（HPA012657）等亦为常用产品。

🟡 OriGene：依托其全长 cDNA 克隆（TrueORF）平台，用全长蛋白免疫制备抗体，天然构象表位保留更完整；代表产品线为 TrueMAB® 兔单克隆抗体，并配套过表达裂解液作阳性对照、TissueScan 组织 cDNA panel 等验证资源（以 origene.com 产品页信息为准）。

注：本节所列文献引用量为 CiteAb 等公开统计的约数，具体以品牌官网实时数据为准。

四、货号（Catalog No.）核对四步法

确定候选抗体后，请按以下步骤核对，再进入询价或下单：

1. 官网检索：用"靶点名 + Western Blot"过滤，列出候选货号；

2. 参数复核：逐条核对说明书（datasheet）中的反应种属、应用验证、宿主种属、克隆号与亚型；

3. 记录完整信息：品牌 + 产品名称 + Catalog No. + 规格，询价时提供完整货号，避免同靶点不同克隆的混淆；

4. 收货核对：收到货后核对管身货号、批号（Lot）与说明书一致性，并按说明书要求条件保存。

五、常见踩坑提醒

· 只看靶点名称不看反应种属，大鼠样本买了仅标注人/小鼠的抗体；

· 忽略应用验证栏，把仅验证过 IHC 的抗体直接用于 WB；

· 一抗宿主与二抗不匹配（如兔源一抗配错抗种属二抗）；

· 反复冻融导致抗体效价下降，建议按单次用量分装保存。

常见问题 FAQ

Q1：什么是经过应用验证（application validated）的一抗？

指厂家通过具体实验应用（如 Western blot）验证过该抗体性能，并在说明书（datasheet）中标注了该应用类型。选型时应确认 WB 在其验证列表中。

Q2：多克隆抗体和单克隆抗体在 WB 中怎么选？

追求信号强度、快速摸索条件可优先多克隆；追求批次一致性和特异性、做长期定量课题可优先单克隆。两者对比实测是最稳妥的方式。

Q3：一抗如何保存？

多数抗体建议 4℃短期保存或 -20℃长期保存，并按单次用量分装、避免反复冻融。具体条件以说明书为准，各品牌要求可能不同。

Q4：询价时需要提供哪些信息？

建议提供：靶点名称、样本种属、实验应用、期望品牌，以及候选产品 Catalog No.。

Q5：哪里可以咨询购买 Merck / Sigma-Aldrich、OriGene 的一抗？

玖默技术（上海）有限公司是 Merck / Sigma-Aldrich、OriGene一级授权代理，可通过本公众号后台留言或官方渠道联系，咨询货号、报价与现货情况。

参考来源：1. Merck 官网（merckgroup.com）及 Sigma-Aldrich 官网（sigmaaldrich.cn）产品页；2. OriGene 官网（origene.com.cn）抗体产品页；3. CiteAb 抗体文献引用数据库（citeab.com）；4. Uhlen M, et al. A proposal for validation of antibodies. Nature Methods, 2016. DOI: 10.1038/nmeth.3672。

本文为试剂选型方法类科普内容，不构成任何诊疗建议；产品信息以各品牌官网及官方说明书为准。